抗體查找方法
在查找抗體的時(shí)候，常常被多個(gè)抗體貨號(hào)和不同的抗體信息所困擾，不知道該如何選擇合適的抗體。本篇文章希望能為大家選擇合適的抗體提供幫助。
一、一抗（primary antibody）的選擇
1）蛋白的名稱(chēng)及亞型。蛋白的名稱(chēng)及亞型：某些蛋白具有多種不同的亞型，如Akt1、2、3，這需要在選擇抗體之前確定要研究的蛋白亞型。如果抗原選擇的是不同蛋白亞型共有的肽段區(qū)域，那我們需要選擇可以同時(shí)識(shí)別Akt1、2、3等多個(gè)亞型的抗體。
2）磷酸化修飾位點(diǎn)。檢測(cè)磷酸化修飾的蛋白，選擇抗體時(shí)則需知道修飾位點(diǎn)。
3）抗體已驗(yàn)證的應(yīng)用（如WB，IHC，IP等）?？贵w一般會(huì)對(duì)抗體應(yīng)用（WB，IHC，IP, ChIP，IF，F(xiàn)low）進(jìn)行內(nèi)部驗(yàn)證，選擇抗體時(shí)需知道客戶(hù)的實(shí)驗(yàn)類(lèi)型。
4）抗體能夠識(shí)別的樣本種屬。抗體一般會(huì)對(duì)不同種屬目標(biāo)樣本進(jìn)行內(nèi)部驗(yàn)證，選擇抗體時(shí)需知道客戶(hù)的樣本來(lái)源。
5）制備抗體的抗原?？贵w是由各種不同免疫原免疫宿主而制備得來(lái)，其中的免疫原包括：全長(zhǎng)蛋白、蛋白片段、多肽、全有機(jī)體（如：細(xì)菌）或細(xì)胞。
6）抗體的動(dòng)物來(lái)源。一抗的動(dòng)物來(lái)源多為兔（rabbit）和小鼠（mouse），如果客戶(hù)已有二抗，選擇抗體時(shí)需知二抗的類(lèi)型。
二、二抗（secondary antibody）的選擇
1）要考慮一抗的物種來(lái)源。例如：如果選擇的一抗是小鼠的單/多克隆抗體，二抗則選抗小鼠的二抗anti-mouse secondary antibody。
2）二抗的選擇要考慮具體的應(yīng)用類(lèi)型。酶聯(lián)（HRP或AP偶聯(lián)）二抗常用于免疫印跡和免疫組化等，熒光標(biāo)記二抗則常用于免疫熒光和流式等。
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